《医院诱惑》的怪物少女们并非单纯的敌人。每一位都承载着一段悲伤的过去，她们的灵魂被困在医院的"里侧"，以扭曲的形式延续着存在。了解她们的故事，是通往真结局的钥匙。以下是对游戏中主要角色的详细介绍。
主要怪物少女
夜巡护士
第一夜的守护者
她是主人公在"里侧"遇到的第一位怪物少女。身着老旧护士服的女性，手持一盏永不熄灭的提灯。她的面容温柔而悲伤，但当她靠近时，周围的空气会骤然变冷。她曾是这家医院最优秀的护士长，在一场医疗事故中为保护病人而牺牲。如今她的灵魂在医院中徘徊，既想保护每一位"病人"，又无法抗拒将他们拖入"里侧"的冲动。
白袍少女
第二夜的出现者
穿着宽大病号服的年轻女孩，总是赤脚在医院走廊中游荡。她的眼神空洞而好奇，仿佛在寻找什么已经失去的东西。她生前是一位因绝症住院的女孩，在孤独和恐惧中度过了生命的最后时光。"里侧"赋予了她永生的能力，但也夺走了她大部分的记忆。她会对善良的对待产生强烈的依恋。
手术医生
第三夜的挑战者
身着沾满血迹的手术服的女性，手持锋利的手术刀。她是前任院长疯狂实验的助手，也是最终的受害者之一。她在"里侧"中保持着高度的理智，但这份理智恰好使她成为最危险的对手。她对主人公的态度取决于主人公之前的行为：如果主人公帮助过其他怪物少女，她可能成为盟友；否则，她将是最无情的追击者。
引导者
第四夜的谜之存在
在"心象空间"中出现的谜之少女。她既不属于现实世界，也不完全属于"里侧"。她自称是"两个世界之间的观察者"，拥有关于医院运作机制的完整知识。她的帮助或阻碍取决于主人公是否愿意正视自己的内心。她是前往真结局的关键角色，也是唯一能够解答所有谜题的存在。然而，她的动机始终模糊——她究竟是在帮助主人公，还是在引导他走向某种更大的命运？
次要角色
前台老护士
现实世界的守门人
白天医院中唯一与主人公互动的人类角色。她是少数知晓医院真相却选择留下的活人。她的职责是确保"新病人"顺利入住——无论这种"入住"最终走向何方。她的动机复杂：既有对超自然力量的敬畏，也有一种扭曲的责任感。她认为医院的"治疗"虽然危险，但确实可能带来某种形式的"疗愈"。
前任院长
一切悲剧的起源（背景角色）
虽然不是游戏中直接出现的角色，但前任院长的阴影笼罩着整个故事。他是一位战后时代的医生，深信人类的欲望是一把双刃剑——既能毁灭人，也能治愈人。他的疯狂实验打开了现实与异界的通道，创造了医院的"里侧"。他本人最终在实验中消失，但遗留下的记录和仪器仍然在驱动着医院运作。
角色关系图谱
游戏中的角色关系构成了一个复杂的网络。夜巡护士曾在前任院长的实验中担任助手，因此她对手术医生抱有复杂的情感——既有愧疚，也有警惕。白袍少女是医院中唯一的"善意"灵魂，她对所有人的态度都是天真而友善的，这种纯粹反而使她成为"里侧"中最脆弱的存在。引导者似乎认识所有角色，但从不透露自己的来源。
主人公与每位角色之间的互动取决于玩家的选择。帮助夜巡护士找到她的提灯（在第一夜探索过程中的隐藏任务），她会在后续夜晚中为你提供庇护。与白袍少女分享你带来的"来自外面世界的物品"（可在第三夜找到），她会揭示关于前任院长的重要信息。在手术医生面前表现出真诚的悔意和勇气，她可能会选择背叛"里侧"的规则，站在你的一边。